Чистота — не количество: что может и чего не может показать анализ пептида

Отчёт с чистотой пептида 99% кажется исчерпывающим. Но это не так. Чистота отвечает лишь на один вопрос. Соответствует ли количество во флаконе этикетке, есть ли эндотоксин и присутствуют ли следовые металлы — три отдельных вопроса, каждый из которых требует своего анализа.

На какой вопрос отвечает каждый анализ

Анализ	Что проверяет	Чего не показывает
Чистота HPLC (высокоэффективная жидкостная хроматография)	Какую долю обнаруженного пептидного сигнала составляет целевой пептид	Количество во флаконе, эндотоксины, металлы
Идентичность LC-MS (жидкостная хроматография с масс-спектрометрией)	Соответствует ли масса молекулы ожидаемому пептиду	Количество во флаконе
Количество во флаконе чистое содержание пептида, в mg	Сколько пептида во флаконе относительно этикетки	Примеси
Тяжёлые металлы ICP-MS	Следовые количества свинца, мышьяка, кадмия и ртути вплоть до частей на миллиард	Идентичность, эндотоксины
Эндотоксин LAL (анализ с лизатом амебоцитов мечехвоста)	Бактериальный эндотоксин, в EU/mg (единицах эндотоксина на миллиграмм)	Идентичность, чистота, количество

Чаще всего неожиданностью оказывается эндотоксин. Эндотоксин — фрагмент бактериальной клеточной стенки. Он активен в нанограммовых количествах и запускает воспалительные сигналы в клетках через иммунный рецептор TLR4. В клеточной культуре или опыте на животных это само по себе может изменить результаты, а процент чистоты об этом не предупредит.

Как это выглядит в настоящем отчёте

Наша партия CJC-1295 (no DAC) 2618CJC5 была проверена независимой лабораторией Janoshik Analytical в Праге. На флаконе указано 5 mg. В отчёте отмечены 4.74 mg пептида и чистота 99.638%. Два числа отвечают на два разных вопроса. Этот и другие отчёты доступны на нашей странице CoA.

Как мы обозначаем проведённые анализы

Мы не заявляем единый набор анализов для всех продуктов. Для проверяемых пептидов определяем чистоту, идентичность и количество; для химически синтезированных пептидов (SPPS) добавляем тяжёлые металлы; анализ на эндотоксины проводим для биологически произведённых пептидов, таких как HGH, hCG и IGF-1 LR3, а также по запросу. На странице каждого продукта показано, какие отчёты доступны для этой партии. Если отчёт ещё не опубликован, указано «по запросу».

Может ли флакон иметь чистоту 99%, но содержать неверное количество пептида?

Да. Чистота — доля вещества в образце, а не его общее количество. Флакон может иметь чистоту 99% и содержать 3 mg при указанных на этикетке 5 mg. Лиофилизированный порошок также содержит противоионы (например, TFA или ацетат) и остаточную воду, поэтому масса пептида меньше массы порошка.

Что такое эндотоксин и почему анализ чистоты его не выявляет?

Эндотоксин — липополисахарид наружной мембраны грамотрицательных бактерий. Он может попасть через воду, буферы или при работе с материалом и особенно важен для пептидов, произведённых в бактериях, например E. coli. LAL-анализ показывает его в EU/mg, на уровнях значительно ниже возможностей хроматограммы чистоты.

Зачем синтетические пептиды проверяют на тяжёлые металлы?

При твёрдофазном синтезе пептидов (SPPS) используют растворители, этапы отщепления с TFA и оборудование из нержавеющей стали, которые могут оставить следовые количества свинца, мышьяка, кадмия и ртути. ICP-MS определяет их на уровне частей на миллиард. Исключение: GHK-Cu специально содержит медь, поэтому её присутствие ожидаемо.

Как проверить подлинность отчёта об анализе?

Проверьте, указаны ли лаборатория, заказчик и номер партии и совпадает ли партия с вашим флаконом. В отчётах Janoshik есть уникальный ключ, который можно ввести на janoshik.com/verify.

Только для лабораторных исследований. Не является медицинской рекомендацией.

Проверить партию →